Amélioration de la durée de vie de fluorophores organiques. Utilisation dans des extraits cellulaires

Nicolas Fiszman (1) , Antoine Le Gall (1) , Hélène Chommy (2) , David Dulin (1) , Hélène Walbott (3) , Dominique Fourmy (3) , Satoko Yoshizawa (3) , Olivier Namy (2) , Nathalie Westbrook (1) , Karen Perronet (1)

1 Laboratoire Charles Fabry / Biophotonique
2 IGM - Institut de génétique et microbiologie [Orsay]
3 CGM - Centre de génétique moléculaire

Nous présentons une étude de la durée de vie avant photoblanchiment du marqueur fluorescent ATTO647N à l'échelle de la molécule unique par microscopie de fluorescence en réflexion totale. Nous avons mesuré la durée de vie avant photoblanchiment dans un tampon usuel et dans des extraits cellulaires. Nous avons ensuite étudié l'influence de l'appauvrissement en oxygène de la solution tampon et l'ajout d'agents oxydants et réducteurs sur la durée de vie de l'ATTO647N dans ces milieux. L'amélioration importante de la durée de vie grâce à la combinaison de ces deux facteurs dans le tampon usuel n'est pas reproductible dans tous les extraits cellulaires. Nous en concluons que les extraits contenant des réservoirs d'oxygène comme l'hémoglobine doivent être prétraités avant d'être appauvris en oxygène par les méthodes habituelles.

Domaines: Biophysique [physics.bio-ph]; Optique [physics.optics]

Nicolas Fiszman, Antoine Le Gall, Hélène Chommy, David Dulin, Hélène Walbott, et al.. Amélioration de la durée de vie de fluorophores organiques. Utilisation dans des extraits cellulaires. OptDiag 2012 Diagnostic et Imagerie Optique en Médecine et Biologie, Biophotonique, May 2012, Paris, France. pp.1. ⟨hal-00708294⟩